呼吸道合胞病毒融合蛋白F在重组杆状病毒表达系统中的表达及抗原性研究

作者：王善辉; 余兵兵; 王希良; 李培锋

来源：免疫学杂志, 2009, (03): 267-270+274.

DOI：10.13431/j.cnki.immunol.j.20090073

• 呼吸道合胞病毒
• 重组杆状病毒
• 融合蛋白F respiratory syncytial viruses
• recombinant baculovirus
• fusion protein F

目的利用杆状病毒表达系统对RSVA型Long株F基因进行表达研究,为RSV重组亚单位疫苗的研制奠定基础。方法用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)扩增F基因,将其克隆到pFastBacHT A载体中,阳性重组质粒转化DH10Bac感受态细胞,PCR鉴定获得阳性克隆,碱裂解法提取阳性质粒,转染Sf9昆虫细胞,获得含F基因的重组杆状病毒质粒,重组病毒感染Sf9细胞72h后,进行SDS-PAGE电泳、间接免疫荧光和Western-blot试验。免疫Balb/c小鼠,用ELISA测定抗体滴度,MTT试验检测T淋巴细胞增殖。结果目的蛋白F在昆虫细胞中有特异性表达,能被F蛋白单克隆抗体所识别,该蛋白诱导了高...