摘要
目的通过RNA干扰技术沉默人子宫颈癌HeLa细胞低氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达,在细胞及移植瘤水平研究低氧对子宫颈癌HeLa细胞多药耐药的影响。方法①将人子宫颈癌HeLa细胞株(记为H0细胞)、转染pGenesil-1空白质粒的HeLa细胞株(记为H1细胞)及转染HIF-1α-shRNA质粒的HeLa细胞株(记为H2细胞)分别行不同时间低氧培养,应用免疫印迹法分析每组HeLa细胞中HIF-1α及多药耐药相关蛋白P-糖蛋白(P-gp)在蛋白水平的表达情况。②应用免疫组织化学法检测HIF-1α及P-gp在上述3种HeLa细胞裸鼠移植瘤模型组织水平的表达情况。结果①免疫印迹法检测发现H0和H1组低氧24h后HIF-1α、P-gp呈强阳性表达,常氧状态下H0、H1和H2组及低氧24h后H2组未见HIF-1α表达,P-gp呈弱阳性表达。②H0、H1、H2组移植瘤中HIF-1α的平均吸光度值分别为(0.5508±0.0771)、(0.5731±0.0538)、(0.1701±0.0884),P-gp的平均吸光度值分别为(0.6976±0.1140)、(0.6964±0.1072)、(0.2138±0.0351)。结论RNA干扰技术沉默人子宫颈癌HeLa细胞低氧诱导因子HIF-1α,可显著降低人子宫颈癌HeLa细胞中HIF-1α及P-gp表达,且二者有明显的相关性。
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