牛冻、鲜精子差异蛋白的双向电泳和质谱鉴定的初步研究

作者：吴承疆; 朱化彬; 王栋; 郝海生; 杜卫华; 赵学明; 路永强

来源：中国畜牧兽医, 2010, (11): 100-105.

• 冻、鲜精子
• 2-DE
• 质谱分析
• 冷冻损伤 frozen and fresh spermatozoa
• 2-DE
• MS
• cryodamage

采用适合于精子裂解的热Trizol法制备牛精子全蛋白质,应用线性固相IPG胶条(pH 3～7、24cm)进行精子全蛋白2-DE电泳,在冻精和鲜精蛋白图谱中分别检测到839±34个蛋白点和564±16个蛋白点,经差异比较和显著性检验,在冻、鲜精子中共得到19个具有显著差异的蛋白点,在冻精中表达上调的蛋白点有9个,表达下调的蛋白点有1个,只在冻精中表达的蛋白点有9个。经过酶解和质谱鉴定,获得了3个差异蛋白点的质谱信息,生物信息学分析结果发现,这3个差异点分别为中性鞘磷脂酶激活结合因子(FAN)、谷胱甘肽S转移酶(GST-Mu5)及锌离子结合细胞色素氧化酶,分别与细胞应激和凋亡有关。推测认为,这3种...

• 单位
  吉林农业大学; 北京市畜牧兽医总站; 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所