摘要
目的探讨Atohl基因在大鼠真皮毛乳头细胞(dermal papilla ceHs,DPCs)中的表达及生物学作用,为治疗感音神经性耳聋建立一种新的方法。方法利用慢病毒介导Atoh1基因感染大鼠DPCs,并联合体外耳蜗corti器共培养。RT-PCR检测Atohl mRNA的表达,显微镜下观察慢病毒感染效率及DPCs形态学变化,免疫组化法检测DPCs细胞特异性抗体的表达。结果 Atoh1感染DPCs 48 h后的转染效率为(87.3±3.1)%,显微镜下可见典型类毛细胞形态样细胞增多;免疫组化显示转染后细胞巢蛋白、神经元特异性烯醇化酶(neuron special endolase,NSE)、胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)阳性细胞率分别为(43.5±2.5)%、(31.3±2.4)%和(10.3±2.9)%;毛细胞特异性肌球蛋白(myosin proteinⅦa,MYOⅦa)表达阳性细胞率为(13.2±1.3)%。结论 Atoh1基因联合体外耳蜗corti器共培养可促进DPCs向耳蜗毛细胞方向分化,为真皮源性干细胞引入内耳治疗感音神经性耳聋提供实验依据。
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单位西安交通大学第二附属医院; 南京医科大学附属南京儿童医院