长链非编码RNA MYC诱导的长链非编码RNA靶向miR-584-3p对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞增殖侵袭和迁移能力的影响

作者：杨波; 杨洁; 傅自力; 王凯^*

来源：中华风湿病学杂志, 2021, 25(10): 669-675,F3.

• 关节炎, 类风湿
• 成纤维细胞
• 细胞增殖
• 细胞运动
• 侵袭
• MYC诱导的长链非编码RNA
• miR-584-3p

目的研究MYC诱导的长链非编码RNA(MINCR)靶向miR-584-3p对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞(RA-SFs)增殖、侵袭和迁移的影响。方法收集25例RA患者和25例接受关节置换手术的关节创伤患者的滑膜组织样本。实时定量PCR检测滑膜组织中MINCR和miR-584-3p表达。分离RASFs进行体外培养, 并将MINCR小干扰RNA(si-MINCR)、miR-584-3p模拟物、si-MINCR与miR-584-3p抑制物(anti-miR-584-3p)转染RASFs, 分别通过细胞计数试剂盒(CCK-8)法、平板克隆实验、划痕愈合实验、Transwell实验检测细胞活力、克隆形成、迁移和侵袭能力的变化。采用双荧光素酶报告基因法评价miR-584-3p对MINCR荧光素酶活性的影响。采用独立样本t检验分析2组间差异, 采用单因素方差分析和SNK-q检验分析多组间差异。结果与正常滑膜组织相比, RA患者滑膜组织中MINCR表达显著上调[(3.27±0.36)与(1.00±0.08), t=30.777, P<0.01], miR-584-3p表达显著下调[(0.43±0.05)与(1.00±0.06), t=36.491, P<0.01]。干扰MINCR表达后RASFs活力[(0.52±0.04)与(1.05±0.09), t=16.144, P<0.05]、克隆形成数[(45±5)个与(99±9)个, t=15.960, P<0.05]、划痕愈合率[(28±3)%与(69±6)%, t=18.013, P<0.01]和侵袭数[(53±5)个与(113±12)个, t=14.019, P<0.01]显著降低。过表达miR-584-3p后RASFs活力[(0.65±0.05)与(1.02±0.09), t=26.063, P<0.05]、克隆形成数[(52±5)个与(98±8)个, t=14.619, P<0.01]、划痕愈合率[(35±3)%与(68±6)%, t=13.711, P<0.01]和侵袭数[(62±5)个与(117±11)个, t=13.346, P<0.01]显著降低。miR-584-3p与MINCR特异性结合, 并显著抑制荧光素酶活性[(0.45±0.04)与(0.97±0.06), t=21.633, P<0.01]。与干扰MINCR比较, 同时抑制miR-584-3p与MINCR后RASFs活力[(0.92±0.07)与(0.49±0.04), t=16.000, P<0.01]、克隆形成数[(86±8)与(45±5), t=14.008, P<0.01]、划痕愈合率[(59±7)%与(27±3)%, t=13.200, P<0.01]、侵袭数[(99±9)%与(54±5)%, t=13.414, P<0.01]显著升高。结论干扰lncRNA MINCR通过靶向上调miR-584-3p表达可抑制RASFs的增殖、迁移和侵袭。

• 单位
  山西医科大学第一医院