基于p53/SLC7A11/GPX4通路研究疏肝祛瘀解毒方诱导肝癌细胞铁死亡的作用机制

作者：蔡晓钧; 杨仁义; 王智槟; 龚怡琳; 王科; 林丽珠; 钟崇; 李菁

来源：中国实验方剂学杂志, 2024, 30(08): 74-82.

DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20232024

• 疏肝祛瘀解毒方
• 肝细胞癌
• 铁死亡
• 增殖

目的：基于肿瘤蛋白53（p53）/溶质载体家族7成员11（SLC7A11）/谷胱甘肽过氧化物酶4（GPX4）通路探讨疏肝祛瘀解毒方诱导肝癌细胞铁死亡。方法：将MHCC97H细胞分为空白血清组（含10%空白血清培养基）、疏肝祛瘀解毒方（SGQYJDF）低浓度组（含5%含药血清、5%空白血清培养基）、SGQYJDF中浓度组（含7.5%含药血清、2.5%空白血清培养基）、SGQYJDF高浓度组（含10%含药血清的培养基）和索拉非尼组(索拉非尼浓度为10μmol·L-1的10%空白血清培养基)。按分组干预24 h后，采用细胞增殖与活性检测（CCK-8）法检测细胞存活率；5-乙炔基-2′-脱氧尿苷（EdU）染色法检测细胞增殖能力；亚铁离子荧光探针（FerroOrange）染色法检测细胞内亚铁离子(Fe2+)水平；比色法检测细胞内丙二醇（MDA）及谷胱甘肽（GSH）水平；透射电镜观察细胞线粒体超微形态；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测铁死亡相关蛋白p53、SLC7A11和GPX4表达水平。结果：细胞活性方面，与空白血清组比较，SGQYJDF各浓度组能够呈浓度相关性地降低MHCC97H细胞存活率，SGQYJDF中、高浓度组的MHCC97H细胞存活率显著降低（P2+水平（P2+水平、MDA水平和GSH水平差异无统计学意义。结论：提示SGQYJDF可能通过上调肝细胞癌MHCC97H细胞内p53的表达、抑制GPX4和SLC7A11的表达，下调GSH的水平，同时导致细胞内Fe2+和MDA的累积，从而诱导其发生铁死亡，抑制其增殖。

• 单位
  湖南中医药大学第一附属医院; 湖南中医药大学; 广州中医药大学第一附属医院