α-烯醇酶对胃癌细胞株MGC-803上皮间质转化的影响

作者：林博德; 吴莉莉; 何荣威; 陈婷婷; 杜进林; 潘海燕; 黄志刚

来源：广东医学, 2018, 39(10): 1460-1465.

DOI：10.13820/j.cnki.gdyx.20180611.007

• 胃癌细胞
• ENO1基因
• 上皮间质转化

目的研究α-烯醇酶(α-enolase,ENO1)对MGC-803胃癌细胞上皮间质转化(epithelialmesenchymal transition,EMT)的作用。方法扩增ENO1基因编码区序列,构建真核表达载体pc DNA3.1/ENO1并测序;脂质体转染胃癌细胞,以pc DNA3.1/ENO1质粒转染细胞为ENO1组,以空质粒pc DNA3.1转染细胞为对照组,Real-time PCR和Western Blot分别检测各组ENO1的mRNA及蛋白表达情况;在转染24 h收集两组细胞,Real-time PCR检测并比较EMT特异标志基因E-cadherin、Snail及Vimentin表达水平;合成特异干扰ENO1的siRNA片段,脂质体转染癌细胞,在转染24 h收集干扰组和对照组细胞,Real-time PCR检测EMT特异基因表达水平。结果 Real-time PCR结果显示,ENO1组ENO1 mRNA相对表达量高于对照组(P<0.05);Western Blot发现,ENO1组ENO1蛋白相对表达量也高于对照组(P<0.05)。结果发现转染24 h后ENO1组E-cadherin、Snail及Vimentin等基因的表达水平与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05);转染24 h后干扰组E-cadherin、Snail及Vimentin等基因的表达水平与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论在胃癌细胞内过表达及干扰ENO1表达,对细胞EMT并无明显作用,ENO1对胃癌细胞功能的影响可能与EMT无关。

• 单位
  广东医科大学; 公共卫生学院; 东莞市大朗医院