摘要
目的:探讨肺金生方在体外对骨髓间充质干细胞(BMSCs)的抗窜扰作用。方法:利用Transwell小室,建立BMSCs与A549细胞共培养模型,以肺金生方冻干粉作用于BMSCs后,普通倒置显微镜观察细胞的形态,CCK8法检测细胞增殖情况,流式细胞术法分析细胞α-SMA表达阳性率,ELISA法检测成纤维细胞特异蛋白-1(FSP-1)、波形蛋白(vimentin)及α-平滑肌动蛋白(α-SMA)分子的表达,进一步用Western blot检测细胞中FSP-1、vimentin及α-SMA蛋白表达水平。结果:梯度浓度的肺金生方冻干粉作用于BMSCs 24 h后,1 mg/mL肺金生方可显著抑制BMSCs的活力,其细胞存活率较对照组(0μg/mL)显著降低(P<0.01);细胞形态由规则的梭形、椭圆形转变为不规则形,细胞数量减少,聚集情况减少;流式细胞仪检测BMSCs与A549细胞共培养后α-SMA表达阳性率上升(P<0.05)。与空白组比较,肺金生方组显著下调了FSP-1、vimentin及α-SMA表达(P<0.05);Western blot法证实,1 000μg/mL肺金生方下调了FSP-1、vimentin及α-SMA的蛋白表达(P<0.05,P<0.01),一定范围内呈浓度梯度依赖性。结论:肺金生方对BMSCs具有一定的抗窜扰作用。
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