突变型Myocilin真核表达载体的构建及体外表达

作者：王莉娜; 葛坚; 刘炳乾; 宋革; 侯飞

来源：眼科学报, 2006, (02): 125-128.

DOI：10.3969/j.issn.1000-4432.2006.02.015

• 定点突变
• 脂质体
• 转染
• Myocilin Site-directed mutagenesis
• Liposome
• Transfection
• Myocilin

目的:构建P370L突变型Myocilin真核表达载体及体外转染体系,为Myocilin功能研究提供实验基础。方法:应用定点诱变技术进行Myocilin基因第1131位氨基酸残基位点的定点突变,利用阳离子脂质体介导体外转染技术瞬时转染人小梁细胞,RT-PCR和WesternBlot检测Myocilin表达.结果:经克隆、测序证实获得突变基因,突变载体转染后人小梁细胞MyocilinmRNA和Myocilin蛋白质表达显著增加。结论:P370L突变型Myocilin真核表达载体成功构建,阳离子脂质体是人小梁细胞有效的体外转染体系。

• 单位
  中山大学中山眼科中心