褪黑素的添加减轻猪精原干细胞的氧化损伤

作者：黄诚彧; 徐德全; 冯哲; 周玲; 刘敏^*

来源：畜牧兽医学报, 2021, 52(07): 1880-1890.

• 精原干细胞
• 分离鉴定
• 褪黑素
• 氧化损伤
• 细胞活力
• 细胞凋亡

旨在研究褪黑素(melatonin, MT)对体外培养猪精原干细胞(spermatogonial stem cells, SSCs)的作用机制。本研究采集3头7日龄健康大白公猪睾丸,利用差速贴壁法获得SSCs。后经形态学观察、碱性磷酸酶染色、标记基因检测及免疫荧光染色鉴定后以SSCs作为试验材料,设置MT浓度梯度(0、50、250、500、1 000μmol·mL-1)组处理SSCs,每组设3个重复(n=3),空白对照组加入0.1%DMSO处理,分别检测添加MT后猪SSCs的细胞活力、活性氧(reactive oxygen species, ROS)水平、谷胱甘肽(glutathione, GSH)含量及凋亡基因表达变化。结果显示:1)分离的克隆团细胞具有SSCs的生长特性,可被碱性磷酸酶染色并表达干细胞标志基因OCT4、SOX2和SSCs标志基因NANOG、PLZF、UCHL1;2)50μmol·mL-1以上的MT在处理48 h后可显著提高SSCs的细胞活力(P<0.05);3)MT可显著降低猪SSCs内ROS水平(P<0.05),极显著增加细胞内GSH含量(P<0.01);4)MT可显著抑制猪SSCs内凋亡蛋白Bax和Caspase3的表达(P<0.05)。MT具有清除猪SSCs中的ROS,提高总GSH含量,抑制凋亡基因表达进而提高细胞活力的作用,可为养殖过程中提高公猪繁殖性能提供参考。

• 单位
  农业部; 华中农业大学