摘要
目的观察清肺益气方对肺癌干细胞样细胞(CICs)增殖的抑制作用及其可能的作用机制。方法人肺癌细胞株A549经传代培养后,采用清肺益气方含药血清进行干预,采用MTT比色法检测肺癌细胞的增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡情况,实时荧光定量PCR法和Western blot法检测p53和Caspase-3基因和蛋白的表达,ELISA法检测VEGF和HIF-1α的表达,Transwell小室侵袭实验法检测肺癌CICs体外侵袭能力变化。结果清肺益气方组细胞增殖抑制率显著高于阴性对照组和空白对照组(P<0.05)。且随着含药血清浓度的增加,其抑制肺癌细胞增殖的作用逐渐增强,呈浓度依赖性,根据公式计算得到清肺益气方的IC50为80.12μmol/m L,且随着给药时间的延长,肺癌细胞形态逐渐皱缩变形,坏死脱落。与空白对照组及阴性对照组比较,清肺益气方组细胞凋亡率明显增加(P<0.05)。清肺益气方处理组细胞中Caspase-3和p53基因mRNA和蛋白的表达水平均显著高于阴性对照组和空白对照组(P均<0.05)。清肺益气方处理组细胞上清液中VEGF和HIF-1α的表达水平均显著低于阴性对照组和空白对照组(P均<0.05)。清肺益气方处理组的侵袭细胞数显著低于阴性对照组和空白对照组(P均<0.05)。结论清肺益气方对肺癌CICs具有显著的抑制作用,其机制可能通过上调凋亡抑制基因和蛋白p53和Caspase-3的表达,促进肺癌CICs的凋亡,削弱肺癌CICs的迁移与侵袭能力,并抑制VEGF和HIF-1α的表达,抑制肿瘤血管的生成等多个靶点发挥抗肿瘤增殖的作用。
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单位廊坊市人民医院