螺内酯对缺氧/复氧处理的人心肌细胞HO-1/Nrf2/SIRT3信号通路及自噬的影响

作者：赵荫涛; 杨海波; 刘源; 张相钦; 郑璐; 徐亚威

来源：中国急救医学, 2021, 41(05): 413-418.

• 螺内酯
• 缺氧/复氧(H/R)
• 心肌细胞
• 血红素加氧酶1/核因子E2相关因子2/沉默信息调节因子3(HO-1/Nrf2/SIRT3)
• 自噬

目的探讨螺内酯对缺氧/复氧(H/R)处理的人心肌细胞血红素加氧酶1(HO-1)/核因子E2相关因子2(Nrf2)/沉默信息调节因子3 (SIRT3)信号通路及自噬的影响。方法体外培养人心肌细胞AC16,设置对照组(AC16细胞正常培养)、H/R组(AC16细胞经H/R处理)、低剂量螺内酯组(AC16细胞经H/R处理+0.5μmol/L螺内酯)、中剂量螺内酯组(AC16细胞经H/R处理+1μmol/L螺内酯)和高剂量螺内酯组(AC16细胞经H/R处理+1.5μmol/L螺内酯)。流式细胞仪检测各组AC16细胞凋亡情况;相应试剂盒检测各组AC16细胞中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测各组AC16细胞中HO-1、Nrf2、SIRT3 mRNA表达情况;蛋白印迹(Western blot)法检测各组AC16细胞中HO-1、Nrf2、SIRT3、微管相关蛋白1轻链3 (LC3)Ⅰ、LC3Ⅱ蛋白表达情况。结果与对照组比较,H/R组AC16细胞凋亡率、MDA含量、LC3Ⅰ蛋白表达水平及LC3Ⅰ/LC3Ⅱ比值明显升高(P <0.05),SOD活性,HO-1、Nrf2、SIRT3 mRNA及蛋白表达水平和LC3Ⅱ蛋白表达水平明显降低(P <0.05);随螺内酯剂量的升高,AC16细胞凋亡率、MDA含量、LC3Ⅰ蛋白表达水平及LC3Ⅰ/LC3Ⅱ比值明显降低(P <0.05),SOD活性,HO-1、Nrf2、SIRT3 mRNA及蛋白表达水平和LC3Ⅱ蛋白表达水平明显升高(P <0.05)。结论螺内酯可能通过激活HO-1/Nrf2/SIRT3信号通路及自噬,减少经H/R处理后的人心肌AC16细胞凋亡,发挥心肌保护作用。

• 单位
  郑州大学第一附属医院