基于生物信息学分析KIF23在肺腺癌中的功能及验证

作者：邢亮亮; 徐雷棣; 常宁; 张勇; 邱丹; 周英; 巨清; 王敏; 张艰^*

来源：国际呼吸杂志, 2023, 43(05).

• 肺肿瘤
• 腺癌
• KIF23
• 免疫组织化学
• 计算信息学

目的探究驱动蛋白超家族23(kinesin superfamily 23, KIF23)在肺腺癌中的表达水平与预后的相关, 以及其对肺腺癌细胞侵袭、迁移和增殖的影响。方法分析基因表达谱数据动态分析(GEPIA)数据库中KIF23在肺腺癌中的表达水平, 利用Kaplan-Meier Plotter数据库分析肺腺癌患者生存周期, 对KIF23进行基因集富集分析(GSEA)。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测肺癌细胞系中KIF23的表达水平, 使用shRNA-KIF23病毒感染细胞, 沉默KIF23的表达。Transwell法检测细胞侵袭、迁移能力。通过细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测细胞增殖能力。通过免疫组织化学染色分析KIF23在肺腺癌和癌旁组织的表达水平。结果 GEPIA数据库分析表明KIF23在肺腺癌(515例)中表达高于正常肺组织(59例), 差异有统计学意义(P<0.001);Kaplan-Meier Plotter进行患者生存周期分析表明高表达KIF23患者358例总生存期(overall survival, OS)短于低表达KIF23患者361例OS, 差异有统计学意义(HR=1.35, 95%CI:1.06～1.70, P=0.013);GSEA结果提示KIF23高表达组的肺腺癌患者255例中心体相关通路和G2/M检查点通路富集程度高于KIF23低表达组患者255例。Transwell结果显示, 转染shRNA-KIF23的H1299和A549细胞迁移率明显低于对照组(F分别为55.45和64.93, 均P<0.001)。转染shRNA-KIF23的H1299和A549细胞的侵袭率也低于对照组(F=68.16和175.00, 均P<0.001)。CCK-8实验结果显示除第1天外, 在第2、3、4、5天H1299和A549肺癌细胞系的2个KIF23敲低组的增殖能力均低于对照组, 差异有统计学意义(H1299细胞F值分别为72.74、113.60、46.93、93.48;A549细胞F值分别为31.07、103.80、92.83、130.20, 均P<0.001)。肺腺癌标本免疫组织化学染色表明KIF23在肺腺癌(53.06±10.78)中表达水平高于癌旁组织(33.03±11.98), 差异有统计学意义(t=9.63, P<0.001)。结论 KIF23在肺腺癌中表达水平高于正常肺组织, 参与了肺腺癌的细胞侵袭、迁移和增殖, 促进了肺腺癌的发生发展, 可能成为新的靶向治疗靶点并作为预测肺腺癌预后的分子标志物。

• 单位
  中国人民解放军空军军医大学