基于高分辨熔解分析的cry1I类基因的克隆、表达及活性分析

作者：赵灿; 张春鸽; 束长龙; 孙冰; 宋福平; 高继国; 张杰

来源：中国生物防治学报, 2013, (01): 68-73.

DOI：10.16409/j.cnki.2095-039x.2013.01.011

• 苏云金芽胞杆菌
• 高分辨熔解分析
• cry1I
• 克隆
• 杀虫活性 Bacillus thuringiensis
• high resolution melting assay
• cry1I-type genes
• cloning
• insecticidal activity

本研究将高分辨熔解分析(high resolution melting assay,HRMA)的方法应用于cry1I类基因的分型。根据已报道的cry1I类基因的保守区设计一对扩增片段为131 bp的通用鉴定引物,利用高分辨熔点仪对产物的熔解曲线进行分析。利用此方法对本实验室保存的标准菌株HD-12进行了cry1I类基因的鉴定,克隆到2个新型的cry1Ib和cry1Id基因,被Bt国际命名委员会分别正式命名为cry1Ib11和cry1Id2。这两种基因在E.coli Rosetta菌株中能正常表达81 kDa的蛋白。Cry1Ib11和Cry1Id2蛋白对小菜蛾Plutellaxylostella...

• 单位
  植物病虫害生物学国家重点实验室; 中国农业科学院植物保护研究所; 东北农业大学