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摘要
目的 探讨温肺化纤汤治疗特发性肺纤维化（IPF）其可能机制。方法 梯度密度离心法分离提取C57BL/6小鼠肺间充质干细胞（LMSCs）。体外培养LMSCs，采用不同浓度（100、200、300、400、500、600、700、800μmol/L）的过氧化氢（H2O2）诱导细胞损伤，MTT法检测LMSCs细胞存活率，选择细胞存活率约为50%的H2O2损伤浓度进行后续试验。细胞分为正常对照组、温肺化纤汤组，温肺化纤汤组设浓度为1600、800、400、200、100、50、25μg/ml,MTT法检测温肺化纤汤的毒性。细胞分为正常对照组、模型组、温肺化纤汤组，温肺化纤汤设浓度为1600、800、400、200、100、50、25μg/ml，根据剂量最小化和疗效最大化的原则，结合细胞存活率确定药物的最佳浓度用于后续试验。实验分为正常对照组、模型组、阳性对照组及温肺化纤汤低、中、高剂量组。除正常对照组外，模型组和温肺化纤汤各剂量组分别在温肺化纤汤预处理24 h后均给予H2O2造模6 h。造模结束后检测细胞上清中葡萄糖摄取量及乳酸水平，RT-PCR检测有氧糖酵解相关酶己糖激酶2 （HK2）、丙酮酸激酶2 （PKM2） mRNA水平。结果 600μmol/L H2O2作用于LMSCs6 h，细胞的存活率为（52.17±0.82）%，并作为后续氧化应激损伤模型的浓度。与正常对照组比较，不同浓度的温肺化纤汤（25～1600μg/ml）对LMSCs均无毒性作用（P>0.05）。与模型组比较，不同浓度（25～1600μg/ml）温肺化纤汤预处理的LMSCs存活率均显著增加（P2O2诱导的细胞氧化应激损伤，从而治疗IPF。
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