摘要
目的研究TM4SF1对内皮细胞体外管腔形成的影响。方法应用qRT-PCR方法检测人脐静脉内皮细胞(HUVECs)中TM4SF1的mRNA表达量;应用siRNA方法瞬时转染HUVECs,采用qRT-PCR方法检测转染48 h与72 h后TM4SF1的沉默效果,选择最佳的转染时间,应用In VitroAngiogenesisAssay Kit观察siControl与siTM4SF1转染后HUVECs体外管腔形成情况。结果 qRT-PCR实验结果显示,HUVECs中表达TM4SF1的RQ值为(0.71±0.11),已知高表达TM4SF1胰腺癌细胞株MPanc96表达TM4SF1的RQ值为(0.56±0.13),两种细胞中TM4SF1表达量差异无统计学意义(P>0.05);siRNA瞬时转染HUVECs 48 h与72 h后,TM4SF1表达分别下降了47.06%与93.14%,HUVECs瞬时转染72 h后进行体外管腔形成实验,通过对管腔形成情况进行评级,siControl转染后HUVECs管腔形成情况为5级(多个闭合管状结构相连形成筛状),siTM4SF1转染后为2级(细胞排列形成夹角)。结论 TM4SF1在HUVECs中高表达,沉默TM4SF1后可以明显抑制HUVECs的体外管腔形成,提示TM4SF1与肿瘤血管形成相关。
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单位中国人民解放军第二军医大学; 上海交通大学医学院附属新华医院; 长海医院消化内科