Online SPE-HPLC法测定骨化三醇软胶囊中的有关物质

作者：吴金平; 杨艳丽; 朱盼盼; 李婷; 黄普广; 王霆

来源：中国卫生检验杂志, 2023, 33(05): 532-535.

• 骨化三醇
• 软胶囊
• 固相萃取
• 双三元高效液相色谱法

目的 建立骨化三醇软胶囊中有关物质测定的Online SPE-HPLC法。方法 骨化三醇软胶囊以甲醇提取，提取液经硅胶柱Online SPE(Solid Phase Extract, SPE)富集后切入分析柱进行分离，以硅胶柱为色谱柱(250 mm×4.6 mm, 5μm),以乙酸乙酯-乙腈-正丙醇(50:10:1)-正己烷(50:50)为流动相A,以正丙醇为流动相B,梯度洗脱；检测波长为265 nm。结果 骨化三醇在0.062 5μg/ml～0.500μg/ml内，骨化三醇前体、反式骨化三醇、1β-骨化三醇在0.002μg/ml～0.16μg/ml内线性关系良好，检测限分别为0.000 74μg/ml、0.000 75μg/ml、0.000 77μg/ml和0.000 79μg/ml,定量限分别为0.002 46μg/ml、0.002 50μg/ml、0.002 55μg/ml和0.002 62μg/ml,回收率均>99.1%,RSD<3.56%,方法专属性、重复性、稳定性和耐用性良好。结论 本法高效、灵敏、准确，可用于骨化三醇软胶囊中有关物质的测定。

• 单位
  河南泰丰生物科技有限公司