转染反义微小RNA-155对人皮肤鳞状细胞癌细胞株A431生长的影响

作者：时磊; 魏明^*; 师广勇; 刘佳; 龚艳杰; 陈河涛; 梁颖红; 涂玲

来源：中华皮肤科杂志, 2018, 51(03): 194-198.

• 癌, 鳞状细胞
• 微RNAs
• RNA, 反义
• 细胞增殖
• 细胞凋亡

目的观察转染反义微小RNA-155(miRNA-155)对人皮肤鳞状细胞癌A431细胞株增殖、凋亡以及细胞迁移和侵袭的影响。方法 A431细胞分为3组, 采用脂质体介导法转染无义序列miRNA-155(无义序列组)、反义序列miRNA-155(反义序列组)或仅用含Lipofectamine 2000的DMEM(空白对照组)处理。实时定量聚合酶链反应检测转染后各组A431细胞miRNA-155的表达水平, 噻唑蓝法检测转染后24、36、72、96、120 h细胞增殖活性, 流式细胞仪检测细胞周期变化和凋亡情况, Transwell法检测细胞迁移与侵袭力。多组间比较采用单因素方差分析, 组间两两比较采用LSD-t检验。结果转染后, 无义序列组、反义序列组与空白对照组中A431细胞miRNA-155相对表达量分别为0.98 ± 0.02、0.28 ± 0.18、1.00 ± 0.01, 3组差异有统计学意义(F = 634.57, P < 0.001), 反义序列组低于空白对照组和无义序列组, 均P < 0.05。孵育72、96、120 h时, 3组细胞存活率差异均有统计学意义(均P < 0.05), 反义序列组细胞存活率在3个时间点均低于空白对照组和无义序列组(均P < 0.05);3组细胞G0/G1期细胞比例、S期细胞比例、细胞增殖指数差异均有统计学意义(F = 23.46、36.81、19.35, P < 0.01)。反义序列组G0/G1期细胞比例(74.63% ± 2.13%)高于空白对照组(62.92% ± 2.56%)和无义序列组(63.75% ± 3.06%), 均P < 0.05;S期细胞比例及细胞增殖指数(9.88% ± 1.83%、25.36 ± 2.13)低于空白对照组(18.86% ± 2.78%、37.08 ± 2.56)和无义序列组(18.33% ± 3.72%、36.25 ± 3.06), 均P < 0.05;反义序列组迁移细胞数和侵袭细胞数低于空白对照组和无义序列组(均P < 0.05)。结论皮肤鳞状细胞癌A431细胞转染反义miRNA-155可减少miRNA-155的表达, 有效抑制A431细胞增殖、迁移、侵袭, 促进其凋亡。

• 单位
  郑州大学第五附属医院