烟草NtNRAMP3b的克隆及功能分析

作者:尹卓然; 轩栋栋; 李晨依; 李长; 柴哲; 王锟瑶; 赵孟琦; 彭靖媛; 董杰; 贾宏昉*
来源:生物技术通报, 2022, 38(12): 175-183.
DOI:10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2022-0382

摘要

铁影响植物的生长发育,在动植物中,天然抗性相关巨噬蛋白NRAMP(natural resistance-associated macrophage protein)家族主要负责Fe、Mn和Cd等金属离子的吸收与转运,研究NtNRAMP3b对Fe的转运机制,为明确NtNRAMP3b在烟草转运铁中的机理提供理论基础。以烟草品种K326的cDNA为模板,克隆烟草NtNRAMP3b,并分析该基因的序列特征,利用RT-qPCR测定NtNRAMP3b的表达模式,运用转基因技术获得NtNRAMP3b-OE(NtNRAMP3b overexpression),并测定其铁浓度。NtNRAMP3b全长1 530 bp、编码509个氨基酸序列。NtNRAMP3b与AtNRAMP3的亲缘关系最近,同源性达74.85%。RT-qPCR结果表明,NtNRAMP3b在叶片中表达量最高,缺铁处理后的相对表达量均增加。缺铁处理后,与野生型相比,NtNRAMP3b-OE生物量增加,叶绿素浓度增加,铁含量降低。NtNRAMP3b主要参与铁元素从液泡向细胞器转运,提高了叶片中铁的吸收与再利用。

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