番茄黄化曲叶病毒CP基因的原核表达载体构建选择

作者：乔宁; 李美芹; 刘永光; 王兴翠; 唐玉海; 魏家鹏

来源：安徽农业科学, 2012, (07): 3901-3902+3905.

DOI：10.13989/j.cnki.0517-6611.2012.07.165

• 番茄黄化曲叶病毒
• 外壳蛋白基因
• pET-32a
• pET-28a
• 诱导表达 Tomato yellow leaf curl virus
• Coat protein gene
• pET-32a
• pET-28a
• Induced expression

[目的]筛选出目的蛋白能够高效表达的重组质粒。[方法]利用原核表达载体pET-32a( )和pET-28a( )成功构建了番茄黄化曲叶病毒(Tomato Yellow Leaf Curl Virus,TYLCV)外壳蛋白(Coat Protein,CP)基因的重组质粒p32a-CP和p28a-CP,并通过PCR和双酶切鉴定了序列连接的正确性;再分别将2个载体转化至BL21(DE3)中,采用不同浓度的IPTG对其进行诱导表达,并进行SDS-PAGE电泳检测。[结果]测序结果显示TYLCV-CP基因已定向插入p32a-CP和p28a-CP中;SDS-PAGE电泳结果显示分子量约为50 kD的目的蛋...

• 单位
  潍坊科技学院