“自体血清+鸡尾酒法”诱导外周血DC成熟的研究

作者：袁开长; 李方成; 李军亮; 许新科

来源：中国临床神经外科杂志, 2008, (06): 351-353+357.

• 树突状细胞
• 自体血清
• 鸡尾酒法
• 诱导
• 成熟 Dendritic cell
• Autologous serum
• Cocktail
• Inducement
• Maturation

目的比较三种不同的分离诱导外周血树突状细胞(DC)成熟的方法。方法取正常成人外周血约180ml,分成三组。分离单核细胞后,经典脂多糖(LPS)诱导组(A组):接种于含RPMI1640+胎牛血清完全培养基的25cm2培养瓶中,2h后弃悬浮细胞,将贴壁单核细胞,用粒-巨噬细胞集落刺激因子和白介素4培养,培养到第6天时加入LPS诱导24h;鸡尾酒诱导组(B组):单核细胞的培养同A组,培养到第6天时用细胞因子组合(1000U/ml肿瘤坏死因子、10ng/ml白介素6、10ng/ml白介素1β、1μg/ml前列腺素E2)诱导24h;自体血清+鸡尾酒诱导组(C组):单核细胞用RPMI1640+10%自体血清完全培养基培养,诱导方法同B组。用流式细胞仪检测各组收集的DC细胞成熟表型CD80、CD86、CD83以及白细胞表面抗原HLA-DR的表达;动态观察各组细胞成熟过程中形态的改变以及其激活淋巴细胞增殖的能力。结果C组DC成熟过程中形态好、突起多;其成熟表型CD86、CD83、CD80以及HLA-DR的平均表达率分别是(88.60±6.34)%、(50.55±4.03)%、(73.89±6.15)%、(93.24±7.78)%,明显高于A、B组(P<0.05);激活淋巴细胞增殖指数为2.03,亦明显高于A、B组(P<0.05)。结论自体血清+鸡尾酒诱导法是一种简单、方便、经济的外周血DC分离诱导成熟的新方法。

• 单位
  中山大学; 合肥市第一人民医院