苎麻酵母cDNA文库的构建与分析

作者:刘婕仪; 苏小慧; 全芮萍; 王昕慧; 刘皖慧; 崔国贤; 杨瑞芳; 佘玮*
来源:分子植物育种, 2023, 21(13): 4295-4300.
DOI:10.13271/j.mpb.021.004295

摘要

酵母cDNA文库构建是进行酵母双杂交的重要前提。获得高容量的苎麻(Boehmeria nivea L.)基因文库,能为深入挖掘苎麻重要性状基因、分子改良苎麻产量和品质提供坚实基础。本研究通过两种纯化方法构建了苎麻c DNA文库,利用SMART合成技术成功构建了高容量的苎麻酵母杂交cDNA文库。实验结果表明分段切胶回收纯化法的重组率和文库滴度分别为92%、2.5×107cfu/m L;SPIN+TE-400纯化双链cDNA纯化法得到的重组率和文库滴度分别为64%、1.32×107cfu/mL。分段切胶回收纯化双链cDNA在去除小片段、文库滴度、转化效率均SPIN+TE-400纯化双链cDNA纯化法好。两种方法构建的文库质量均达到酵母筛选文库标准,可用于苎麻基因表达调控的研究和互作蛋白的筛选试验。