AKT蛋白激酶活化对弥漫性大B细胞淋巴瘤细胞生物学行为影响的体外研究

作者：张铁成; 周晓燕; 于宝华; 张太明; 施达仁

来源：中华病理学杂志, 2007, 36(05): 318-323.

DOI：10.3760/j.issn:0529-5807.2007.05.008

• 淋巴瘤,B-cell
• 蛋白激酶类
• 细胞周期
• 淋巴细胞培养试验,混合

目的观察 AKT 及磷酸化 AKT（pAKT,即 AKT 呈活化状态）)蛋白激酶在三个弥漫性大 B 细胞淋巴瘤（DLBCL）细胞株中的表达状态,并探讨其与 DLBCL 细胞生物学行为的关系以及P13K 抑制剂 LY294002对该瘤细胞生长的影响。方法采用 Western blot 检测 DLBCL 细胞株 ly1、ly8、ly10在有血清和无血清培养条件下 AKT 和 pAKT 的表达状态;用 P13K 抑制剂 LY294002分别作用于三株细胞,观察 pAKT 水平的改变;用流式细胞术结合碘化丙啶（PI）单染分析细胞周期、AnnexinV-异硫氢酸荧光素（FITC）染色检测细胞凋亡、BrdU 法观察细胞增殖状态的改变。结果三株DLBCL 细胞株在不同的培养条件下均显示有 pAKT,在10%FBS 培养组 ly8和 ly10之 pAKT 水平高于无血清培养组;而 ly1相反,在无血清培养组 pAKT 略高于有血清培养组。在有血清培养组,LY294002可明显降低三细胞株细胞的 pAKT 水平,并显示 S 期细胞明显减少（P<0.05）,G0～G1期细胞增加,增殖细胞比例显著降低（P<0.05）,以 ly8、ly10细胞尤为明显;但凋亡细胞无明显增加（P>0.05）。结论 AKT 活化与 DLBCL 细胞周期和细胞增殖密切相关;与细胞凋亡无显著相关;LY294002可通过降低 DLBCL 细胞的 pAKT 水平继而抑制瘤细胞生长。

• 单位
  复旦大学; 复旦大学附属肿瘤医院