摘要
目的比较人肺腺癌细胞系A549和正常人肺上皮细胞系BEAS-2b、肺腺癌和癌旁组织中RNA甲基化转移酶的表达。方法分别采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白免疫印迹(Western blot)方法检测A549和BEAS-2b细胞中RNA甲基化转移酶mRNA及蛋白的表达水平;采用免疫组化法(IHC)检测肺腺癌与癌旁组织中RNA甲基化转移酶的表达。结果 RT-qPCR检测结果显示,与BEAS-2b细胞相比,A549细胞中甲基化转移酶样蛋白3(METTL3)mRNA的表达水平显著上升(t=5.708,P<0.05),而甲基化转移酶样蛋白14(METTL14)和肾母细胞瘤1相关蛋白(WTAP)mRNA的表达水平显著下降(t=24.080、9.207,P<0.05)。Wes-tern blot检测显示,与BEAS-2b细胞相比,A549细胞中METTL3、METTL14蛋白的表达水平均显著上升(t=6.502、6.869,P<0.05),而WTAP蛋白的表达水平显著下降(t=8.822,P<0.05)。IHC检测显示,METTL3、METTL14定位于细胞核内,肺腺癌组织中二者的表达水平较癌旁组织显著升高(t=3.055、4.339,P<0.05);WTAP定位于细胞核和细胞质内,肺腺癌组织中其表达水平较癌旁组织显著下降(t=3.611,P<0.05)。结论A549细胞和肺腺癌组织中RNA甲基化转移酶的表达与BEAS-2b细胞及癌旁组织相比有明显差异,提示可能存在某些依赖于N6-甲基腺嘌呤(m6A)修饰的机制影响肺腺癌的发生发展。
-
单位青岛市中心医院; 青岛大学