牡丹ACS基因片段的克隆及反义植物表达载体构建

作者：范丙友; 高水平; 刘改秀; 史国安; 李嘉珏; 孔祥生

来源：华北农学报, 2010, (06): 34-37.

• 牡丹
• ACC合成酶
• 反义植物表达载体 Paeonia suffruticosa
• ACS
• Antisense plant expression vector

根据GenBank登录的牡丹ACS基因DNA全长序列(FJ769773),设计一对特异性引物,在优化的PCR扩增体系的基础上,应用高保真DNA聚合酶KOD-Plus从洛阳红牡丹叶片总DNA中扩增出牡丹ACC合成酶基因片段PsACS-4。测序结果表明:克隆序列长970 bp,不包含牡丹ACS基因内含子序列,与目标序列同源性达100%;用SacI和SmaI对重组质粒和空载体pBI121双酶切、连接,将PsACS-4基因片段反身插入到植物表达载体pBI121的35S启动子下游,成功构建了牡丹ACS反义基因植物表达载体。

• 单位
  中国洛阳国家牡丹基因库; 河南科技大学