双歧杆菌插入失活载体的构建

作者：崔佳; 万翠香

来源：山西医科大学学报, 2015, 46(12): 1180-1182.

DOI：10.13753/j.issn.1007-6611.2015.12.005

• 双歧杆菌
• serpin基因
• 氯霉素抗性基因cmr
• 插入失活载体

目的构建双歧杆菌serpin基因插入失活载体,为探究双歧杆菌外膜蛋白Serpin功能做准备。方法在实验室前期构建的p MD18-T/serpin质粒中serpin基因片段的SacⅡ酶切位点插入氯霉素抗性基因cmr,构建双歧杆菌p MD18-T/serpincmr,插入失活载体。结果 PCR成功扩增出了氯霉素抗性基因cmr且测序结果正确;p MD18-T/serpin质粒经SacⅡ单酶切、去磷酸化后与cmr连接,通过菌落PCR、酶切验证和测序显示cmr已成功插入serpin基因片段中。结论成功构建了双歧杆菌serpin基因插入失活载体p MD18-T/serpin-cmr。

• 单位
  长治医学院; 南昌大学食品科学与技术国家重点实验室