摘要
目的探讨在低糖缺氧大鼠H9C2细胞中,沉默长链非编码RNA(lncRNA)NR_027324的表达对H9C2细胞凋亡的影响。方法将H9C2心肌细胞在低糖缺氧环境中培养以构建心肌缺血缺氧模型。采用转染小干扰RNA(small interfering RNA,si-RNA)技术沉默NR_027324。利用逆转录定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法测定lncRNA NR_027324的表达变化。检测乳酸脱氢酶(LDH)活性评估细胞损伤,MTT法检测细胞成活率,蛋白质免疫印迹法检测凋亡相关蛋白的相应变化。结果与对照组相比,低糖缺氧大鼠H9C2细胞中,NR_027324表达量明显上调,LDH升高,细胞成活率下降(P<0.001)。沉默NR_027324的表达后,低糖缺氧大鼠H9C2细胞中NR_027324表达量明显下调,LDH进一步升高,MTT法检测提示细胞成活率进一步下降(P<0.001)。低糖缺氧大鼠H9C2细胞中,Bax,cleaved-caspase3和cleaved-caspase9表达增加,Bcl-2表达下降(P<0.001)。沉默NR_027324的表达后,低糖缺氧大鼠H9C2细胞中Bax,cleaved-caspase3和cleaved-caspase9表达进一步增加,Bcl-2表达进一步下降(P<0.001)。结论低糖缺氧大鼠H9C2细胞中,沉默NR_027324的表达能够促进低糖缺氧H9C2细胞的凋亡,可能作为研究调控缺血缺氧心肌细胞凋亡的新靶点。
-
单位中国医科大学附属盛京医院; 中国医科大学; 辽宁省肿瘤医院; 辽宁省人民医院