CRISPR/Cas9系统编辑拟南芥dcl2drb4的双链结合蛋白7.1

作者：张春微; 张秀春; 符艳; 武亚丹; 刘志昕; 吴坤鑫^*

来源：分子植物育种, 2022, 20(15): 5005-5010.

DOI：10.13271/j.mpb.020.005005

• 双链结合蛋白7.1
• 转基因拟南芥
• CRISPR/Cas9
• 基因编辑

为获得拟南芥dcl2drb4drb7.1三突变体，本研究构建基于CRISPR/Cas9系统靶标Drb7.1基因保守序列的重组质粒，并通过花粉管通道法转化拟南芥双突变体dcl2drb4。T1代转基因植物Drb7.1扩增产物测序分析，发现有9个样品在Drb7.1第二个靶位点出现双峰，可能已发生编辑。对第13号转基因T1代植株单克隆测序分析表明，在Drb7.1第二个靶位点分别插入了一个碱基(C或者A)。T2代转基因植株测序分析表明，有9株植物为纯合的Drb7.1被编辑的dcl2drb4drb7.1突变体，为研究DRB7.1是否参与DCL4介导的抵御TCV病毒的RNA沉默信号通路提供了实验材料。

• 单位
  中国热带农业科学院热带生物技术研究所