TAp63对MPP+处理的SH-SY5Y细胞半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9和酪氨酸羟化酶表达的影响

作者：刘晨; 任继文; 谢安木^*

来源：中国临床神经科学, 2023, 31(02): 132-137.

• 帕金森病
• TAp63基因
• 酪氨酸羟化酶
• 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9
• SH-SY5Y细胞系
• 1-甲基-4-苯基吡啶离子

目的探讨TAp63基因表达水平对1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)诱导的帕金森病(PD)细胞模型细胞活性、酪氨酸羟化酶(TH)和凋亡因子半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9(caspase-9)的影响。方法将小鼠神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y细胞系)依据不同处理方法分为6组：(1)对照组，无任何干预措施；(2)MPP+处理组，MPP+10μmol·L-1处理24 h;(3)TAp63-NC组，用携带无义序列的慢病毒颗粒转染48 h;(4)TAp63-NC+MPP+组，用携带无义序列的慢病毒颗粒转染48 h后，加MPP+10μmol·L-1处理24 h;(5)TAp63过表达组，用携带过表达TAp63基因的慢病毒颗粒转染48 h;(6)TAp63过表达+MPP+组，用携带过表达TAp63基因的慢病毒颗粒转染48 h，换液后予以MPP+10μmol·L-1处理24 h。采用CCK-8法检测6组细胞的存活率；Western blot法检测TAp63、TH、caspase-9表达水平。结果CCK-8检测显示，与对照组比较，MPP+组细胞活性显著下降(P<0.01)。与TAp63-NC+MPP+组比较，TAp63过表达+MPP+组细胞存活率升高，差异有显著统计学意义(P<0.001)。Western blot检测显示：与对照组比较，MPP+组的TAp63蛋白和TH蛋白表达量降低，而caspase-9表达量升高(均P<0.05)；与TAp63-NC+MPP+组比较，TAp63过表达+MPP+组TAp63蛋白和TH蛋白表达量升高，而caspase-9蛋白表达水平降低(均P<0.05)。结论TAp63基因过表达可提升MPP+诱导的PD细胞的存活率，提高TH表达量，降低caspase-9表达水平，进一步发挥其潜在的神经保护作用。

• 单位
  神经内科; 青岛大学附属医院; 青岛大学