摘要
目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)对6羟基多巴胺(6OHDA)诱导的PC12细胞变性损伤的保护及机制。方法用PC12细胞制作帕金森病细胞模型,采用四甲基偶氮唑蓝法检测暴露于梯度浓度VEGF165后细胞的活性;流式细胞术检测对照组、损伤组(单加6OHDA)、VEGF组(单加VEGF165)和VEGF保护组(同时加6OHDA和VEGF165)细胞凋亡率(每组5个样本);免疫印迹法检测PC12细胞VEGF165及其受体fms样酪氨酸激酶1(Flt1)、胎肝激酶1(Flk1)、神经纤毛蛋白1(Nrp1)的表达,并观察VEGF165及其受体中和抗体对VEGF165作用的影响。结果随着VEGF165的浓度增加到50~100ng/ml时,PC12细胞吸光度由0.14±0.06逐步上升至0.35±0.08(P<0.01),随后又稍下降;细胞凋亡率VEGF保护组(29.65%±6.63%)低于损伤组(57.10%±5.66%),但高于VEGF组(3.67%±1.51%)和对照组(4.76%±1.06%,P<0.01);免疫印迹实验检测到PC12细胞有VEGF165及Flt1和Nrp1的表达,而未检测到Flk1;抗VEGF165和抗Nrp1中和抗体可阻断VEGF165的作用,而抗Flt1抗体无作用。结论VEGF165可保护PC12细胞因6OHDA造成的损伤,Nrp1受体在其中发挥重要作用。
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单位神经内科; 华中科技大学同济医学院附属协和医院; 华中科技大学同济医学院附属同济医院