Hlrg基因定点突变体的构建及其对HepG2细胞的影响

作者:杜可军; 常文辉; 侯立朝; 宋庆贺; 刘承利; 陈苏民; 陈景元; 柴玉波
来源:科学技术与工程, 2006, (10): 1341-1344.

摘要

构建Hlrg基因的定点突变体,研究突变Hlrg基因表达的蛋白对HepG2细胞的影响。首先利用数据库对Hlrg基因的结构特点进行分析,在此基础上用PCR法构建Hlrg基因的定点突变体。将突变的Hlrg基因克隆到pcDNA3.1(+)载体中,并稳定转染到HepG2细胞中。流式细胞仪和透射电镜观察突变基因表达的蛋白对HepG2细胞的影响。结果获得了针对Hlrg基因的定点突变体,亮氨酸拉链中的第二个亮氨酸被突变成丝氨酸。发现稳定表达HLrgm蛋白的HepG2细胞中出现一定比例的凋亡细胞。表明构建了Hlrg基因定点突变体,为进一步的功能研究奠定了基础。

  • 单位
    第四军医大学