ApoE基因敲除构建大鼠缺血性脑卒中模型的实验研究

作者：王雄; 邬玉芹; 陈红; 张武; 何占平; 陈泽谷; 夏鹰; 余丹; 陈晶^*

来源：中国实验诊断学, 2020, 24(08): 1302-1306.

DOI：10.3969/j.issn.1007-4287.2020.08.024

• 载脂蛋白E
• 核磁共振
• 缺血再灌注
• 免疫印迹法
• 磁共振

目的探讨采用载脂蛋白E(ApoE)基因敲除构建稳定的大鼠缺血性脑卒中的过程。方法选用健康的6周龄雄性ApoE基因敲除大鼠100只,SPF级SD雄性大鼠100只,依据大鼠种类分为两组。用线栓法堵塞大脑中动脉2h,缺血后2h向外拔出线栓约2mm再灌注22h后行Zea-Longa评分,评分在2-3分为成功模型。统计不同种类大鼠成模成功率情况;在模型构建3d、7d时行神经功能缺损严重程度评分(NSS)和横木行走实验(BWT)评分评估模型的稳定性,同时行核磁共振(MRI)检查了解各处理梗塞病灶范围及变化;再通后灌注7d断头取脑,进行氯化三苯基四氮唑(TTC)染色及荧光染色观察梗塞范围变化情况。结果 ApoE基因敲除大鼠与SD大鼠两组模型3d内成功率高,分别为76%和77%,7d内模型成功率分别为75%和73%,两组无统计学差异(P>0.05)。ApoE基因敲除大鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)模型缺血再通灌注7d时NSS和BWT评分较3d时稍减低,但无统计学差异;SD大鼠模型组在缺血再通灌注7d时NSS和BWT评分较3d时稍减低,但有显著统计学差异(P<0.001)。MR影像显示缺血区域呈现明显高信号,随时间推移两组动物模型缺血范围呈先扩大后缩小趋势,SD组大鼠模型缺血范围较ApoE基因敲除组大。TTC染色缺血区染染成苍白色。ApoE基因敲除模型组荧光标记显示神经细胞大小、分布较SD组均匀,阳性细胞数明显高于SD组(P<0.05)。结论 ApoE基因敲除大鼠可用于制备稳定的MCAO模型。

• 单位
  中南大学湘雅医学院; 海口市人民医院