Circ＿0044516靶向调控miR-516a-5p对胃癌细胞增殖、迁移和凋亡的影响

作者：方惠^*; 李莹; 桑怡

来源：世界华人消化杂志, 2022, 30(09): 393-401.

• Circ＿0044516
• miR-516a-5p
• 胃癌细胞
• 增殖
• 迁移
• 凋亡

背景Circ＿0044516在胃癌中高表达,抑制circ＿0044516能促进胃癌细胞增殖和诱导凋亡.生物学软件预测miR-516a-5p与circ＿0044516相互结合,miR-516a-5p在非小细胞肺癌低表达,但是在胃癌细胞研究暂不清楚.本研究主要探究circ＿0044516靶向调控miR-516a-5p对胃癌细胞增殖、迁移和凋亡的影响.目的探究circ＿0044516是否靶向调控miR-516a-5p及对胃癌细胞增殖、迁移和凋亡的影响.方法q RT-P C R实验检测胃上皮细胞G E S-1和胃癌细胞SNU-16、HGC-27中circ＿0044516、miR-516a-5p表达水平.将HGC-27细胞分为si-NC组(转染si-NC)、sicirc＿0044516组(转染si-circ＿0044516)、miR-NC组(转染miR-NC)、miR-516a-5p组(转染miR-516a-5p)、sicirc＿0044516+anti-miR-NC组(共转染si-circ＿0044516和anti-miR-NC)、si-circ＿0044516+anti-miR-516a-5p组(共转染si-circ＿0044516+anti-miR-516a-5p).定量即时聚合酶链锁反应(quantitative real time polymerase chainreaction,qR T-PCR)实验检测circ＿0044516和miR-516a-5p表达水平;噻唑蓝(methylthiazolyldiphenyltetrazoliumbromide,MTT)实验检测细胞增殖;流式细胞术实验检测细胞凋亡; Transwell实验检测细胞迁移;蛋白免疫印迹(Western blot)实验检测p21、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein, Bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(B cell lymphoma/lewkmia-2, Bcl-2)、基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase 2, MMP2)蛋白表达;双荧光素酶报告实验检测circ＿0044516和miR-516a-5p靶向关系.结果与胃上皮细胞GES-1相比, circ＿0044516在胃癌细胞SNU-16、HGC-27中表达水平增加,miR-516a-5p表达水平降低.沉默circ＿0044516或过表达miR-516a-5p降低胃癌细胞存活率、迁移细胞数,增加细胞凋亡率,增加p21、Bax蛋白表达,降低Bcl-2、MMP2蛋白表达. circ＿0044516靶向负调控miR-516a-5p的表达,抑制miR-516a-5p可以部分回复沉默circ＿0044516对胃癌细胞增殖、迁移和凋亡的影响.结论Circ＿0044516可通过靶向负调控miR-516a-5p抑制胃癌细胞增殖和迁移,并诱导细胞凋亡.

• 单位
  浙江中医药大学; 杭州市中医院