马动脉炎病毒膜蛋白基因截短型的克隆及其在大肠埃希氏菌中的表达

作者：杜建; 王志亮; 宋厚辉; 金宁一; 张念祖

来源：中国兽医科技, 2005, (03): 22-26.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2005.03.004

• 马动脉炎病毒
• 膜蛋白基因
• 原核表达载体 equine arteritis virus
• membrane protein gene
• prokaryotic expression vector

　　 根据马动脉炎病毒膜蛋白(M)的核苷酸序列,设计合成了 1 对引物,从 pUC 18 M质粒中扩增出截短的膜蛋白M基因片段。对该片段及 pGEX 6P 1 载体双酶切并连接,成功构建了原核表达载体pGEX 6P Mt。将此重组质粒转化BL21(DE3)宿主菌,对培养条件及诱导表达条件等影响表达的因素进行了优化;诱导后菌体裂解物经 SDS PAGE分析发现,在约 34 ku处出现了 1条特异性的蛋白条带,其分子质量与预期的M截短蛋白的分子质量相符,并随着诱导时间的延长而变化,在诱导后4 h达到高峰。结果表明,膜蛋白 M基因截短型在大肠埃希氏菌中得到了高效表达。

• 单位
  农业部动物检疫所; 中国科学院微生物研究所