摘要

目的:探讨MSX1基因缺失导致的牙发育异常的机制及可能的信号途径。方法:体外培养成牙本质细胞系MDPC-23,加入地塞米松(DEX),根据0、2、4、16、24 h时间节点完成细胞收集,采用荧光定量PCR测定细胞中MSX1、ALP、OC及MMP-2 mRNA表达水平。采用CRISP R-as9基因编辑技术对构建MSX1基因敲除小鼠成牙本质细胞进行精密编辑,设为观察组;选择成牙本质细胞系MDPC-23为对照组。采用实时荧光PCR和Wertern Blot法测定两组细胞中MSX1基因、ALP、OC及MMP-2蛋白水平。结果:成牙本质细胞系MC3T3-ET随着培养时间的延长MSX1基因、ALP、OC及MMP-2基因表达存在明显差异性。MSX1基因、ALP、OC及MMP-2基因培养12 h表达量均高于0、6、16及24 h(P<0.05)。观察组MSX1基因缺失后ALP、OC及MMP-2 mRNA水平均低于对照组(P<0.05);观察组ALP、OC及MMP-2蛋白水平明显下降,均低于对照组(P<0.05)。结论:MSX1基因缺失能引起牙发育异常,其机制可能与ALP、OC、MMP-2蛋白水平下调有关,从而引起相关信号通路途径异常。其机制可能与ALP、OC及MMP-2蛋白水平下调有关,从而引起相关信号通路途径异常。