特应性皮炎差异表达基因筛选及KLF15对AD小鼠血清中Th1/Th2型细胞因子水平的影响

作者：唐情; 汪海珍^*; 汪碧滢; 易婷婷; 王力; 罗菲菲; 冉崇军; 罗美俊子; 严伊宁; 黄盼; 彭友华; 潘意; 周蓉

来源：中国皮肤性病学杂志, 2023, 37(06): 645-651.

DOI：10.13735/j.cjdv.1001-7089.202211075

• 特应性皮炎
• Krüppel样因子15(KLF15)
• Th1/Th2平衡
• 炎症因子

目的 分析特应性皮炎(AD)患者皮损组织中差异表达基因(DEGs)及其功能作用，并探究其中的Krüppel样因子15(KLF15)对AD小鼠血清中Th1/Th2型细胞因子水平的影响。方法 基于GSE157194芯片筛选AD患者皮损组织中的差异表达基因，通过Metascape在线分析工具进行基因本体(GO)功能分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。进一步通过基因芯片验证KLF15在AD皮损组织与正常皮肤组织中的差异表达水平及治疗前后的表达变化。将16只BALB/c小鼠随机分为对照组(n=4),模型组(n=4),OE-NC组(n=4,空载质粒),OE-KLF15组(n=4,KLF15过表达质粒)。利用二硝基氯苯(DNCB)涂抹小鼠左耳构建AD小鼠模型，验证KLF15在AD小鼠组织中的表达水平。构建KLF15过表达载体，并注射至各小鼠皮损处，qPCR和Western blot检测转染效率，酶联免疫吸附试验(ELISA)检测白细胞介素(IL)-4、IL-13、IL-31和干扰素(IFN)-γ的表达水平。结果 与正常皮肤组织相比，治疗前AD患者的皮损组织中有74个下调的DEGs及331个上调的DEGs,主要与细菌应答、炎症反应、Th2型免疫激活、皮肤发育、细胞离子代谢、调节类固醇代谢过程以及Wnt通路调控显著相关。与治疗前正常皮肤组织样本(AN)相比，皮损组织样本(AL)中KLF15表达显著下调(|logFC|>1,P<0.05)。使用度普利尤单抗或环孢菌素治疗3个月后，AN与AL中KLF15表达水平差异无统计学意义(|logFC|>1,P>0.05)。对照组小鼠表皮、真皮结构正常，无炎性细胞浸润。模型组小鼠出现棘层肥厚、真皮层水肿并伴有大量炎细胞浸润。与对照组小鼠比较，AD小鼠KLF15 mRNA及蛋白水平显著下调(P<0.05)。与OE-NC组比较，OE-KLF15组小鼠血清中IL-4、IL-13和IL-31的表达水平显著下调(P<0.01),KLF15、IFN-γ的表达水平显著上升(P<0.01)。结论 KLF15在AD患者皮损组织中下调，KLF15可能通过改善AD小鼠血清中Th1/Th2平衡，减轻炎症反应，缓解皮肤损伤。

• 单位
  湖南中医药大学; 湖南中医药大学第二附属医院