鲍曼不动杆菌外膜蛋白A1S1969的克隆表达及免疫保护机制初步研究

作者：蔡昌芝; 冯强; 杨赟; 魏振波; 纪永军; 牟道华; 敬海明; 邹全明; 曾浩

来源：免疫学杂志, 2016, 32(02): 104-108.

DOI：10.13431/j.cnki.immunol.j.20160022

• 鲍曼不动杆菌
• 基因工程疫苗
• 克隆表达
• 重组蛋白
• 免疫保护

目的制备鲍曼不动杆菌(Ab)A1S1969重组蛋白,利用小鼠全身脓毒血症感染致死模型评价A1S1969重组蛋白的免疫保护效果,探讨可能的免疫保护机制,为筛选Ab疫苗有效的保护性抗原奠定基础。方法基于反向疫苗学技术筛选出Ab外膜蛋白A1S1969,利用p GEX-6P-2质粒构建GST融合表达载体,重组表达的A1S1969蛋白经亲和层析高效纯化后与铝佐剂吸附制备而成重组A1S1969免疫原;采用Balb/c小鼠全身感染模型评价A1S1969重组蛋白的免疫保护效果,通过ELISA检测免疫小鼠Ig G抗体滴度和Ig G抗体亚型。制备A1S1969重组蛋白抗血清进行体外调理吞噬杀菌实验。结果成功克隆、表达并纯化A1S1969重组蛋白,纯度>90%。动物免疫保护结果显示A1S1969重组蛋白组小鼠存活率为55.6%,对照组小鼠存活率为20.0%(P<0.05);末次免疫7 d后小鼠体内总Ig G抗体滴度为1∶64 000,以Ig G1亚型为主;体外调理吞噬杀菌实验结果显示A1S1969特异性血清抗体可以增强中性粒细胞对Ab的杀菌作用,实验组杀菌率可达55%,对照组无杀菌活性。结论 A1S1969重组蛋白可显著提高全身脓毒血症感染致死模型小鼠的存活率,具有良好的免疫保护效果。

• 单位
  第三军医大学