牛支原体、巴氏杆菌A型和化脓隐秘杆菌多重PCR快速检测方法的建立

作者：肖淦文; 陈颖钰; 彭清洁; 胡长敏; 崔朋; 巴晓亮; 陈焕春; 郭爱珍

来源：中国奶牛, 2012, (21): 4-9.

• 多重PCR
• 牛支原体
• 多杀性巴氏杆菌A型
• 化脓隐秘杆菌
• 牛呼吸疾病综合征 Multiple PCR
• Mycoplasma bovis
• Pasteurella multocida type A
• Arcanobacterium pyogenes
• Bovine respiratory disease complex

本试验旨在建立一种可同时鉴别牛支原体、巴氏杆菌A型和化脓隐秘杆菌的多重PCR方法。分别针对多杀性巴氏杆菌A型特异的hyaC—hyaD基因区段、化脓隐秘杆菌的16S rRNA基因上保守区段和牛支原体的UvrC基因设计特异性引物,多重PCR的最佳扩增条件确定为:95℃10min预变性;95℃1min,56℃50s,72℃1min,循环30次;72℃10min延伸。结果表明,该多重PCR方法可同时扩增出以上三种致病菌的特异性片段,不能扩增出其他病原菌的相关片段;对多杀性巴氏杆菌A型、化脓隐秘杆菌和牛支原体的最低检测浓度分别为8×105CFU/mL、8×105CFU/mL和4×106CFU/mL。同时...