siRNA对家蝇拟除虫菊酯抗性基因cyp6d1沉默效果研究

作者：孔庆鑫^*; 韦凌娅; 沈林海; 王英红; 曹阳

来源：中国预防医学杂志, 2019, 20(11): 1049-1053.

DOI：10.16506/j.1009-6639.2019.11.020

• 家蝇
• cyp6d1基因
• RNA干扰
• 抗性
• 荧光定量PCR
• 拟除虫菊酯

目的利用siRNA对家蝇拟除虫菊酯抗性基因cyp6d1的表达进行干扰,并对基因沉默效果进行评价。方法人工合成家蝇cyp6d1基因的siRNA,编号为C474、C1226、C1446;采用微量注射方式将其导入实验室筛选出的cyp6d1基因高表达家蝇品系个体中;采用荧光染料PCR法对RNA干扰处理组和对照组家蝇体内mRNA的表达量进行定量测定,观察不同处理组cyp6d1基因的沉默效应。结果微量注射导入C474、C1226、C1446和阴性对照的家蝇cyp6d1基因mRNA表达量组间差异有统计学意义(F=14.948,P=0.000),组内比较显示各处理组与阴性对照组mRNA的表达量差异均有统计学意义。注射C474、C1226、C1466的处理组之间差异无统计学意义(F=2.615,P=0.101)。相对于阴性对照,注射了C474、C1226、C1466的处理组mRNA抑制率分别为63.74%、72.28%和65.99%。结论采用微量注射方式将人工合成的siRNA C474、C1226、C1446导入家蝇体内,可以在mRNA水平上对其cyp6d1基因的表达实现有效沉默。

• 单位
  杭州市疾病预防控制中心