乙肝病毒X蛋白上调骨桥蛋白表达增强肝癌细胞干性的研究

作者：李政言; 祥蔚; 王晓东; 刘梦楠; 冯涛; 甘立霞; 谢斌

来源：免疫学杂志, 2017, 33(07): 553-558.

DOI：10.13431/j.cnki.immunol.j.20170098

• 骨桥蛋白
• 乙肝病毒x蛋白
• 肝细胞肝癌
• 干性

目的在乙型肝炎病毒(HBV)相关性肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中探讨乙肝病毒x蛋白(HBx)对骨桥蛋白(osteopontin,OPN)表达及肝癌细胞干性的影响。方法采用免疫印迹(Western blot,WB)及免疫组化等方法在肝癌组织标本上检测OPN表达水平与患者性别、年龄、AFP、HBV病毒复制量、肿瘤大小、TNM分期等临床病理因素的关系;在稳定整合HBV基因组的HepG2.2.15细胞系及慢病毒介导的HBx转染HepG2细胞中,进一步验证HBV及HBx过表达对OPN及干性相关转录因子Nanog、Oct4,干性细胞表面标记分子CD44、CD90、Ep CAM表达水平的影响。结果免疫组化及WB检测结果均表明OPN在HBV阳性的HCC肝癌组织中的表达水平显著高于HBV阴性的肝癌组织(P<0.05)。HepG2.2.15细胞中OPN的mRNA及蛋白质含量较HepG2细胞显著增加(P<0.05);在HepG2细胞中,过表达HBx显著上调OPN mRNA及蛋白质水平(P<0.05),流式细胞术定量分析显示过表达HBx的HepG2细胞中Ep CAM、CD90阳性的干性细胞数量明显升高(P<0.05),实时定量PCR显示干性相关转录因子Nanog、Oct4及其表面标志分子CD44、CD90、Ep CAM水平显著升高。结论 HBx能够显著上调OPN的表达,并增强肝癌细胞的干性,提示HBx/OPN/肝癌细胞干性增强通路可能在HBV相关HCC患者预后不良中具有重要作用。

• 单位
  第三军医大学; 第三军医大学西南医院; 重庆医科大学