近缘新对虾PCNA基因的克隆及表达分析

作者：张艳; 罗志平; 李运东; 杨其彬; 姜松; 陈创华; 黄建华; 杨丽诗; 陈旭; 江世贵; 周发林^*

来源：南方水产科学, 2023, 19(04): 58-67.

• 近缘新对虾
• PCNA
• 克隆
• 基因表达

增殖细胞核抗原(Proliferating cell nuclear antigen, PCNA)作为DNA聚合酶δ的辅助蛋白，在DNA复制过程中发挥重要作用。近缘新对虾(Metapenaeus affinis)卵巢发育过程中存在细胞增殖活动旺盛的阶段，但目前关于其卵巢发育的分子机制研究较少。利用RACE (Rapid amplification of cDNA ends)技术获得近缘新对虾PCNA (MaPCNA)基因的cDNA序列全长，并通过实时荧光定量PCR (qRT-PCR)对其进行卵巢发育相关的表达分析。MaPCNA全长为1 144 bp，包含140 bp的5’非编码区，221 bp的3’非编码区，开放阅读框(ORF)为783 bp，编码260个氨基酸。MaPCNA蛋白的相对分子质量为28.82 kD，理论等电点为4.5。多重比对分析表明，PCNA氨基酸序列在甲壳动物中较为保守。组织表达结果显示，MaPCNA基因在检测的组织中均有表达，其中在卵巢中的表达量最为显著(P<0.05)。在不同发育阶段的卵巢中，MaPCNA基因的表达出现变化(P<0.05)，从Ⅰ期开始逐渐上升，到Ⅲ期表达量最高，之后显著降低并趋于平稳。MaPCNA基因在幼体发育不同时期的表达呈现出一定的规律性趋势，在受精卵时期的表达量最高，之后呈下降趋势，从无节幼体Ⅵ期开始表达平稳。研究结果提示PCNA基因可能在近缘新对虾的卵巢发育过程中发挥重要作用。

• 单位
  中国水产科学研究院南海水产研究所; 珠海市现代农业发展中心