EphA2调控头颈部鳞状细胞癌血管新生及转移的体内实验

作者：刘勇; 张欣; 余长云; 邱元正; 黄东海; 周小娟; 谭平清; 肖健云; 田勇泉

来源：中华耳鼻咽喉头颈外科杂志, 2012, (01): 53-57.

DOI：10.3760/cma.j.issn.1673-0860.2012.01.014

• 头颈部肿瘤
• 癌,鳞状细胞
• 受体,EphA2
• 肿瘤转移
• 新生血管化,病理性

目的研究EphA2对头颈部鳞状细胞癌(简称鳞癌)血管新生及颈淋巴转移的影响。方法利用慢病毒介导的短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)沉默EphA2在高转移性头颈鳞癌细胞株M2中的表达,嘌呤霉素筛选稳定克隆,反转录PCR及Western blot技术检测EphA2沉默效果;构建头颈鳞癌高转移动物模型,通过HE染色验证其成瘤及颈淋巴转移情况;免疫组织化学技术检测移植瘤微血管密度,Western blot技术检测移植瘤标本中EphA2及血管内皮生长因子(VEGF)的表达情况。结果筛选出EphA2基因稳定沉默的M2细胞(定义为M2 EphA2 RNA~+即实验组),并成功构建头颈鳞癌高转移动物模型,成瘤率达100%。25 d后,实验组移植瘤体积为(430.7±190.0)mm~3(x±s,以下同)较对照组的(1 179.0±289.4)mm~3明显减少(t=5.597,P<0.01),质量显菩减轻(t=-4.560,P<0.05),且双侧颈淋巴转移率明显降低(Mann-Whitney U=10.0,P<0.05)。Western blot显示实验组移植瘤组织中EphA2及VEGF蛋白表达显著下调,免疫组织化学技术发现实验组瘤体微血管密度为(4.74±0.67)个/视野,显著少于对照组的(14.17±0.59)个/视野(t=26.751,P<0.01)。结论 EphA2沉默能抑制头颈部鳞癌细胞的生长及转移,并能明显减少头颈部鳞癌组织内的肿瘤新生血管,且该肿瘤新生血管的抑制可能与促血管生成因子VEGF的减少有关。

• 单位
  中南大学湘雅医院; 长沙市第一医院