非洲猪瘟病毒p72和CD2v双基因实时荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用

作者：蔡晓丽; 区贤斌; 李雪平^*

来源：动物医学进展, 2021, 42(11): 41-47.

DOI：10.16437/j.cnki.1007-5038.2021.11.008

• 非洲猪瘟病毒
• 双重荧光定量PCR
• 分子诊断和监测

为了建立一种快速、准确、敏感的非洲猪瘟病毒p72和CD2v基因双重荧光定量PCR方法,根据GenBank公布的ASFV基因序列,针对p72基因保守区域和CD2v基因保守区域分别设计特异性引物和探针,并且对反应条件进行了优化。结果显示,该方法对ASFV p72、CD2v基因呈现特异性扩增,对猪瘟病毒(CSFV)、口蹄疫病毒(FMDV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪肺炎支原体均无扩增。建立的方法可检出低至7.3copies/μL～24.5 copies/μL的ASFV核酸。用建立的方法检测2017年以前保存的105份来自国内猪场的血清和组织样本,105份样品均无ASFV核酸扩增。用该方法检测5份ASFV灭活参考样品,符合率为100%。说明建立的方法快速、敏感、准确,可用于ASFV的分子诊断和监测。

• 单位
  广州悦洋生物技术有限公司