欧前胡素抑制人肾癌786-O细胞增殖并促进其凋亡

作者：景红梅; 樊海燕; 黄小勇; 杜娟; 张静; 慕明涛; 史海燕^*

来源：山西医科大学学报, 2023, 54(10): 1323-1330.

DOI：10.13753/j.issn.1007-6611.2023.10.004

• 欧前胡素
• 肾癌
• 细胞增殖
• 细胞凋亡
• 死亡受体途径
• 网络药理学

目的 探究欧前胡素(imperatorin)对人肾癌细胞786-O增殖及凋亡的影响，初步研究其作用机制。方法 分别使用0,20,40,60,80,100,120,140,160,180,200μmol/L的欧前胡素处理786-O细胞24,48,72 h后，CCK-8法检测786-O细胞增殖，并计算IC50,筛选最佳干预浓度进行后续实验。生物显微镜观察细胞形态变化；CCK-8实验和克隆形成实验检测各组细胞增殖能力的变化；流式细胞术检测各组细胞凋亡的情况；RT-qPCR和Western blot方法检测各组Fas、Caspase-8、Caspase-3、Bcl-2的表达情况。从TCMSP和HERB数据库收集欧前胡素作用靶点。由GeneCards数据库获取肾癌疾病靶点，使用STRING数据库构建蛋白互作网络，并筛选欧前胡素治疗肾癌的核心靶点。结果 欧前胡素作用786-O细胞24 h和48 h的IC50分别为94.36μmol/和65.66μmol/L。与0μmol/L组相比，40μmol/L组786-O细胞体积减小，细胞密度略减少，增殖能力受到抑制(P<0.01),细胞凋亡率增加(P<0.01);80μmol/L组细胞壁皱缩明显，细胞密度明显减少，增殖能力明显被抑制(P<0.001),细胞凋亡率明显增加(P<0.001)。RT-qPCR和Western blot实验结果显示，与0μmol/L组相比，40μmol/L组Fas、Caspase-8、Caspase-3的表达上调(P<0.05),80μmol/L组上述3个分子表达明显上调(P<0.01),Bcl-2则无明显变化。通过网络药理学方法筛选出7个欧前胡素治疗肾癌的核心靶点，分别为GSK3β、CDK2、PPARG、ESR1、MAPK14、AR、PTGS2。结论 欧前胡素可能是通过靶向GSK3β调控死亡受体途径，进而抑制肾癌786-O细胞的增殖，并促进其凋亡。

• 单位
  延安大学; 榆林市第一医院