摘要
目的 讨论小鼠肾小管上皮细胞(mRTEC)来源外泌体(mRTEC-EXO)对脓毒症肾脏损伤炎症反应的影响。方法 制备mRTEC-EXO,使用透射电子显微镜观察其形态,通过共聚焦显微镜观测其是否被胚胎肾(EK)细胞摄取。将84只SPF小鼠随机分为对照组[腹腔注射生理盐水(NS)]、LPS组(腹腔注射LPS)、LPS+mRTEC-EXO组(腹腔注射LPS同时尾静脉注射mRTEC-EXO),每组各28只。NS注射后或LPS干预12 h后,随机处死各组小鼠均12只,收集新鲜肾脏组织切片后行HE及免疫组化染色,观察肾小管、肾小球形态变化及肾小管间质炎性细胞、中性粒细胞的浸润程度。每组剩余16只小鼠继续观察至150 h,记录其存活情况。采用Western blot检测mRTEC-EXO中CD9、CD63、Calnexin及3组小鼠肾脏组织中MPO、MDA、TNF-α和IL-1β的表达水平。结果 Western blot结果显示,mRTEC-EXO表面标志物CD9和CD63呈高表达,而阴性标志物Calnexin呈低表达。共聚焦显微镜观察结果显示,EK细胞可主动摄取mRTEC-EXO。对照组小鼠生存率均高于LPS组和LPS+mRTEC-EXO组,LPS+mRTEC-EXO组生存率高于LPS组(P<0.05)。与对照组比较,LPS组和LPS+mRTEC-EXO组小鼠肾脏组织中TNF-α、IL-1β、MDA、MPO表达水平均明显升高;与LPS组比较,LPS+mRTEC-EXO组TNF-α、L-1β、MDA、MPO表达水平均明显降低(P<0.05)。与对照组比较,LPS组及LPS+mRTEC-EXO组小鼠肾脏组织炎性浸润程度明显增加。与LPS组比较,LPS+mRTEC-EXO组小鼠肾脏组织炎性浸润程度明显降低。结论 mRTEC-EXO可抑制中性粒细胞浸润并减弱脓毒症肾脏损伤炎症反应。
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