p21活化激酶6削弱非小细胞肺癌A549细胞侵袭及迁移能力的分子机制

作者：蔡松旺; 李冬霞; 安军; 张军航

来源：中国病理生理杂志, 2014, 30(01): 67-71.

• 微小RNA-23a
• p21活化激酶6
• 基质金属蛋白酶9
• 非小细胞肺癌

目的:探讨调控p21活化激酶6(PAK6)的微小RNA(miRNA)与非小细胞肺癌侵袭及迁移的关系,并了解PAK6下游分子信号机制。方法:通过生物信息学数据库预测靶向PAK6的miRNA,转染miRNA模拟物及抑制剂,Western blotting及实时定量荧光PCR(real-time PCR)检测A549细胞中PAK6的表达量,萤光素报告酶实验检测预测miRNA对PAK6的调控,并行体外迁移及侵袭实验,检测转染miRNA对PC-3细胞迁移及侵袭能力的影响。转染目标miRNA及siPAK6,Western blotting检测A549细胞基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达量。结果:生物信息学预测miR-23a可能是调控PAK6的靶向miRNA。Western blotting检测转染miR-23a组PAK6表达量下降69%,而转染miR-23a抑制剂组PAK6表达量上升52%,差异均有统计学意义。萤光素报告酶实验结果显示,转染miR-23a后野生型PAK6组萤光素酶活性下降52%,而突变组差异无统计学意义(P>0.05)。Real-time PCR检测3组PAK6 mRNA的表达差异无统计学意义(P>0.05)。体外迁移及侵袭实验示,转染miR-23a组迁移细胞数减少73%,侵袭的细胞数减少59%。Western blotting检测发现,转染siPAK6组MMP-9的表达下降85%(P<0.01),转染miR-23a组MMP-9的表达下降76%(P<0.01)。结论:miR-23a通过PAK6-MMP-9信号途径引起非小细胞肺癌细胞迁移及侵袭能力的下降。

• 单位
  中山大学附属第三医院; 新乡医学院; 机能实验室