摘要
目的探讨microRNA-375(miR-375)对结直肠癌(CRC)细胞侵袭迁移的影响及该影响与Notch2通路蛋白的关系。方法将表达miR-375的慢病毒转染入人CRC细胞HCT-116细胞中作为实验组,将空载慢病毒转染入HCT-116细胞中作为阴性对照组(NC组),未转染HCT-116细胞作为空白组,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法检验转染效率,Transwell小室实验检测细胞侵袭和迁移能力,Western Blot方法检测Notch2通路蛋白的相对表达。再将Notch2小干扰RNA(siRNA)转染入HCT-116细胞中作为Notch2-siRNA组,将阴性对照转染入HCT-116细胞中作为Notch2阴性对照组,未转染HCT-116细胞作为空白组,采用Western Blot方法检测3组细胞Notch2蛋白表达量,采用Transwell小室实验进一步验证Notch2表达的改变对CRC细胞侵袭迁移的影响。结果 CRC细胞中miR-375表达明显低于人正常结直肠黏膜细胞(t=33.00,P<0.05)。使HCT-116细胞中的miR-375过表达后,与NC组和空白组相比,细胞的侵袭、迁移能力均下降(F=223.40~894.16,P<0.05),且Notch2通路蛋白相对表达量下降(F=100.63,P<0.05)。将Notch2下调后,与Notch2阴性对照组和空白组相比,Notch2-siRNA组细胞的侵袭迁移能力下降(F=144.31~197.54,P<0.05)。结论上调miR-375表达可以抑制CRC细胞的侵袭迁移,这一作用可以通过调控Notch2来实现。
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单位青岛市市立医院; 青岛大学