敲除TRIF基因对TLR3介导胰岛β细胞损伤的影响及机制研究

作者：张子月; 朱祎婧; 钟大鹏^*

来源：检验医学与临床, 2023, 20(06): 739-742.

• TRIF
• Toll样受体3
• 胰岛β细胞
• 核转录因子-κB

目的 探讨敲除TRIF基因后，激活Toll样受体3(TLR3)对胰岛β细胞增殖的影响及可能的作用机制。方法 首先利用CRISPR/Cas9技术，在小鼠胰岛素瘤β细胞NIT-1细胞株中敲除TRIF基因，得到敲除TRIF基因细胞株。再以敲除TRIF基因的NIT-1细胞株为研究对象，用DMEM培养基进行细胞培养，当细胞处于增殖期比例达到80%～90%时进行实验分组，分为空白对照组和实验组，实验组予以不同水平(30、60、90μg/mL)的TLR3特异性激动剂病毒聚肌胞(PIC)刺激，刺激干预48 h后再检测细胞增殖、细胞周期与凋亡蛋白表达，以及核转录因子-κB(NF-κB)的mRNA和蛋白表达。结果 与空白对照组相比，PIC刺激敲除TRIF基因后的NIT-1细胞株，细胞停留在G0/G1期细胞的比例明显上调，而在S期和G2/M期的细胞比例出现明显下调，差异均有统计学意义(P<0.05);CyclinD1表达在不同水平的PIC刺激下明显下调(P<0.05);细胞因子NF-κB和凋亡蛋白Caspase-3的表达在不同水平的PIC刺激下则明显上调(P<0.05)。结论 PIC刺激敲除TRIF基因后的小鼠胰岛β细胞株的TLR3,与刺激正常小鼠胰岛β细胞株一样，仍可以上调细胞因子NF-κB和凋亡蛋白Caspase-3的表达，以及抑制周期蛋白CyclinD1的表达，最终抑制胰岛β细胞增殖。

• 单位
  成都新华医院