CYP1A1基因cDNA全长的T载体克隆及序列分析

作者：肖勇梅; 刘**; 魏青; 招小林; 侯孟君; 凌文华

来源：毒理学杂志, 2006, (01): 7-9.

DOI：10.16421/j.cnki.1002-3127.2006.01.003

• 细胞色素P450(CYP1A1)
• T-载体
• 测序分析

目的构建含KpnI、XhoI双酶切位点的人细胞色素(CYP1A1)基因cDNA全长的pGEM-T载体,为以后的亚克隆和毒理学研究提供实验材料。方法从培养的人乳腺癌细胞(MCF-7)中抽提总RNA,RT-PCR扩增CYP1A1基因cDNA全长,与pGEM-T载体连接后转化DH5α,筛选阳性克隆,抽提重组质粒并进行PCR及酶切鉴定,再行测序分析。结果重组质粒pGEM-T-1A1 PCR后获得了1 568 bp产物,酶切鉴定证实目的片段成功插入至pGEM-T,测序分析也进一步证明了目的片段与GeneBank中CYP1A1mRNA的序列同源性为99.9%。结论成功地构建了含CYP1A1基因cDNA全长区域的T载体。

• 单位
  中山大学公共卫生学院