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摘要
目的 探讨自噬及自噬相关蛋白5(ATG5)和ATG7在神经干细胞（NSC）体外扩增中的作用。方法 从SD胚胎大鼠脑组织中分离NSC在体外进行培养，在NSC体外扩增过程中测量神经球直径大小变化，并用CCK-8试剂盒检测细胞增殖率，通过Western印迹检测ATG5、ATG7、微管相关蛋白1轻链3(LC3)及增殖细胞核抗原（PCNA）的蛋白表达水平，利用透射电子显微镜观察自噬泡形成情况，免疫荧光分析LC3及Ki67的表达，EdU掺入法检测细胞增殖能力。进一步经过自噬抑制剂Baf A1干预处理，或用siRNA敲低Atg5/Atg7表达后评价自噬及自噬蛋白ATG5/ATG7在NSC体外扩增中的作用。结果 在NSC体外扩增过程中自噬活性及增殖能力逐渐增强；用Baf A1抑制自噬后NSC的增殖受到明显抑制，表明自噬活性增加能促进NSC增殖。此外，与对照组相比，敲低Atg5或Atg7后，NSC的自噬活性和增殖能力均明显下降。结论 自噬能促进NSC在体外扩增中的增殖能力，在这一过程中ATG5和ATG7对于维持NSC自噬活性是必不可少的。
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单位蛋白质组学国家重点实验室
